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技術(shù)文章
疾病防控常用Elisa試劑盒的血清標本是如何儲存的？點擊次數(shù)：1375 更新時間：2020-04-22
疾病防控常用Elisa試劑盒，它本身帶有良好的吸附性能,白紙也相對較低,孔底有較高的透明度。其中，它一般適用于血清血漿組織勻漿細胞培養(yǎng)基尿液等樣品類型,其中血清是常見的標本之一。下面讓我們一起來了解一下疾病防控常用ELISA試劑盒血清標本保存注意事項：
一、在采集樣品和分離血清時,應盡可能避免細菌污染.在一種情況下,細菌分泌的一些酶可能分解抗原和抗體等蛋白質(zhì)；一些內(nèi)生酶,如大腸桿菌中的?-半乳糖苷酶,會干擾以相應酶標記的測定方法.
二、應注意避免嚴重的溶血.血紅蛋白含有類似過氧化物的血紅素基團,因此,在測定HRP作為標記酶時,如果血清樣品中血紅蛋白濃度較高,則在孵育過程中容易吸附到固相,因此與HRP底物發(fā)生反應.
三、用細菌污染引起的混濁或絮體保存樣品時,應離心沉淀,然后取涂片進行檢測.
四、如果用無菌手術(shù)分離血清樣本,可在2℃保存一周,如果酶聯(lián)免疫吸附試驗滅菌,建議冷凍保存,樣品應長期保存在-70℃以下.
五、冰凍血清樣本應注意避免因斷電等引起的反復凍融,反復凍融產(chǎn)生的機械剪切力會破壞樣品中的蛋白質(zhì)和其他分子,造成假陰性結(jié)果.此外,凍融標本混合也要小心,不要劇烈振蕩,反復反混合.
疾病防控常用ELISA試劑盒是以免疫反應為基礎,將抗原和抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用結(jié)合起來的一種高度靈敏的檢測技術(shù).由于抗原和抗體的反應是在聚苯乙烯微滴定板的孔內(nèi)進行的,所以添加的每一種試劑都可以通過洗滌去除多余的游離反應物,從而保證檢測結(jié)果的特異性和穩(wěn)定性.用雙抗體夾心法測定樣品水平,用微孔板包覆純化抗體制成固相抗體,將固相抗體依次添加到單克隆抗體包被的微孔中,再與HRP標記的抗體結(jié)合形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,*洗滌后加入底物TMB進行抗體開發(fā).在HRP酶催化下將ELISA試劑盒TMB轉(zhuǎn)化為藍色,在酸性作用下轉(zhuǎn)化為Zui終黃色,顏色深度與樣品呈顯著正相關,酶標儀在450nm波長處測定吸光度（OD值）,用標準曲線計算樣品濃度.
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