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技術文章
喹諾酮類檢測試劑盒的試驗步驟介紹點擊次數：849 更新時間：2022-09-18
喹諾酮類檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預包被偶聯抗原，樣本中的殘留物喹諾酮類藥物和微孔條上預包被的偶聯抗原競爭抗喹諾酮類藥物抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留喹諾酮類藥物的含量成負相關，與標準曲線比較即可得出相應殘留物喹諾酮類藥物的含量。
將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上,洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。實驗開始前需：將20×濃縮洗滌液用去離子水按1:19稀釋成工作洗滌液。
1、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
2、加樣反應：加標準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶標記物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應45分鐘。
3、洗滌：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
4、顯色：每孔加入底物液A50µl，再加底物液B50µl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。
5、終止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應。
6、測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應終止反應后在10分鐘內完成。
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