人西尼羅河病毒IgG ELISA檢測試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

檢查

1.實驗室檢查

白細胞數(shù)減少，腦炎型者腦脊液中淋巴細胞增多，蛋白增高。

2.免疫學檢查

利用血清學抗體檢測方法，常用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實驗）法，采用患者急性期和恢復期雙份血清，兩份血清同時進行檢測，以恢復期血清較急性期特異性IgG抗體滴度升高4倍以上為陽性，有助于本病的診斷。

3.病原學檢查

自潛伏末期至發(fā)病后第5天，從患者血液或腦脊液中分離出病毒，陽性率較高，對新分離病毒的鑒定一般采用已知血清進行中和實驗。

4.分子生物學檢查

RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應）法檢測，通過設計西尼羅河熱病毒特異引物對血清或腦脊液標本進行RT-PCR試驗，陽性率高，具有特異性診斷價值。

用途

西尼羅(WN)病毒IgG ELISA，利用了西尼羅重組抗原檢測人體血清或血漿中的西尼羅抗體。本實驗僅用于輔助診斷人感染了西尼羅病毒，不用于篩查血液或血液成分。僅供專業(yè)人員體外診斷使用。

概述

 感染了西尼羅病毒會導致包括腦炎等一系列癥狀的疾病，西尼羅病毒在世界廣泛傳播，已在50多個國家檢測出該病毒。本試驗經(jīng)CDC提供的試劑檢驗與驗證。本試驗使用了一種稱為WNRA的重組抗原，它可以作為西尼羅病毒感染的快速血清學指標，WNRA蛋白是一種重組抗原，它是由含有西尼羅病毒兩個抗原的序列多肽構(gòu)成。

實驗的原理

檢測西尼羅病毒IgG ELISA 是基于兩步夾心法原理制造的。

提供的材料

• 微孔板（96孔 12x8）：即用  每孔均包被結(jié)合西尼羅重組抗原的單抗。2－8℃下保存至保質(zhì)期。

注意：WNRA和NCA已包被于微孔板。

• IgG樣品稀釋液：1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
• IgG陰性質(zhì)控：1支 30ul  2-8℃下保存至使用。要長時間儲存，將其分裝于小瓶里，在-70℃下儲存。
• IgG陽性質(zhì)控：1支 30ul  2-8℃下保存至使用。要長時間儲存，將其分裝于小瓶里，在-70℃下儲存。
• 洗滌液（10X）：1瓶 120ml  2－8℃下保存至使用。
• EnWash：1瓶 20ml 2－8℃下保存至使用。
• 酶聯(lián)物：一瓶6ml 即用 2－8℃下保存至使用。
• TMB底物液： 1支 9ml 即用  2－8℃下保存至使用。
• 終止液；1支6ml 即用  2－8℃下保存至使用。

試劑應避免反復凍融。

西尼羅河引發(fā)腦炎IgG免疫診斷試劑盒

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熱帶病西尼羅河病毒檢測試劑盒

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出入境西尼羅河病毒檢測試劑盒

出入境西尼羅河病毒檢測試劑盒

人西尼羅河病毒IgG ELISA檢測試劑盒

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a. 吸出生長液，用PBS將單層細胞洗1次  b.在單層細胞中加入1.5ml溶于1×HBS的15%甘油，在37℃  培養(yǎng)0.5～3minc.吸出甘油，用PBS將單層細胞洗1次d.加入  5ml預加溫的*生長液，放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)24～60h  后，檢測DNA的瞬時表達或?qū)⒓毎匦路N入適當?shù)倪x擇性培  養(yǎng)基中，分離穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化體。④業(yè)以表明，丁酸鈉也可以  在猴源和人源細胞中增強帶SV40早期啟動子/增強子的重組  質(zhì)粒的表達。可直接在生長液中加入有關試劑，也可以使  經(jīng)過甘油休克的細胞接受丁酸鈉處理。須視細胞型別的不  同，采用不同濃度的丁酸鈉（500mmol/L貯存液，在化學通  風櫥中用NaOH中和丁酸制備而成），例如：CV-1  10mmol/LNIH-3T3 7mmol/LHelaS3 5mmol/LCHO  2mmol/L不加*生長液，然后重復步驟d。（6）轉(zhuǎn)移基因  表達和細胞集落形成①瞬時表達：在轉(zhuǎn)染后48～60h收獲細  胞，進行RNA或DNA雜交分析。